Protocol集合
Exosomes ( Exo)-Free 胎牛血清(FBS)制备
1)将商品化FBS于4℃融化并分装。
2)将上述FBS分装到超速离心管(Cat: #355618,Beckman)中,每管25 ml,100,000 g × 14-16 h(OPTIMAL-100XP;Rotor:70-Ti;Beckman),4℃。
3)离心后从超速离心管中轻轻取出,切勿摇动,利用移液器将90%上清液吸出到50 ml新无菌离心管(Corning)中。
注:不要倾倒,利用移液器贴着液面吸取,以避免搅动底部沉淀,剩余10%可用于细胞冻存或普通细胞培养实验。
4)将上述转移到新离心管中的FBS混匀后在超净台中使用0.22 μm滤器(Millipore)进行除菌,将滤出液转移到新的无菌离心管中进行分装,4℃保存(短期内使用,长时间储存请放置到-20℃保存)。
徐孝东 8月30日 8 4 0

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